Pfu DNA聚合酶是从高温嗜热菌Pyrococcus furiosis分离出的高保真耐高温DNA聚合酶，分子量为90 kDa，具有3’→5’外切核酸酶活性，能纠正DNA扩增（PCR）过程中产生的错误，而传统的Taq DNA聚合酶等都不具有这种功能。其他高温 DNA 聚合酶如：Vent，DeepVent，Tli，UlTma 等也具有校正功能，但是Pfu是目前已发现的所有DNA Polymerase中扩增DNA时出错率最低的。Pfu DNA Polymerase比普通的Taq DNA Polymerase热稳定性更好，95°C下1h仍保持 90%以上的活力。

来源：高温嗜热菌Pyrococcus furiosis。

规格：5 U/µL。

应用

常规 PCR、高保真 PCR、基因定点突变、克隆表达。

运输与保存方法

冰袋运输。产品-20°C保存。

活性定义

在74°C下，30 min内，使10 nmol的dNTPs掺入酸不溶性沉淀所需的酶用量定义为1个活性单位(U)。

储存缓冲液

20 mM Tris-HCl(pH8.2)； 0.1 mM EDTA； 0.1%Tween20；0.1%NP-40； 1mM DTT；100mM KCl；50% (v/v)甘油。

10X PCR Buffer

200 mM Tris-HCl(pH8.8)；100 mM KCl；100mM (NH4)2SO4；20mM MgSO4；1.0mg/mL BSA；1.0% TritonX-100。

反应体系

50μL PCR体系：

模板 DNA	10～100 ng
上游引物（10～20 pmol）	2μL
下游引物（10～20 pmol）	2μL
10×PCR Buffer	5μL
dNTP（each 10 mM）	1μL
Pfu DNA Polymerase（5U/μL）	1μL
ddH₂O	Up to 50μL